核酸内切酶酶联免疫吸附测定（ELISA）说明书-PROGEN Endonuclease ELISA

更新时间：2025-09-24

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核酸内切酶水平的快速简便定量

PROGEN 核酸内切酶 ELISA 试剂盒是一种高灵敏度检测方法，专为体外检测粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）来源的核酸内切酶（包括 DENARASE®）及含 DENARASE® 的样品而设计。

该检测方法可用于多种工艺来源的样品，包括腺相关病毒（AAV）基因治疗载体生产过程中的样品。在 AAV 纯化过程中，会添加核酸酶以降解多余的 DNA 杂质。然而，不受控的核酸酶活性可能会破坏关键成分（如 AAV 载体基因组和质粒 DNA），导致产量降低、纯度下降，更重要的是可能影响最终基因治疗产品的安全性和治疗效果。因此，常规监测核酸内切酶水平对于保障产品完整性和维持治疗效果至关重要。

检测原理

该核酸内切酶 ELISA 试剂盒采用微孔板形式进行双抗夹心 ELISA 检测，具体流程如下：

微孔板的孔中包被有特异性单克隆捕获抗体，用于捕获样品（如细胞裂解液或纯化病毒制剂）中存在的粘质沙雷氏菌来源的核酸内切酶。捕获的核酸内切酶通过两步法进行检测：

1.生物素偶联的单克隆检测抗体（抗体偶联物）与固定化的核酸内切酶结合。

2.链霉亲和素 - 过氧化物酶偶联物（HRP 偶联物）与生物素分子结合。

加入底物溶液（TMB，四甲基联苯胺）后会发生显色反应，显色强度与孔中分析物（核酸内切酶）的浓度成正比。通过光度法在 450 nm 波长下（参比波长为 620–690 nm）测量吸光度。未知样品中的核酸内切酶浓度可根据相应的 DENARASE® 标准曲线计算得出。

为何选择本核酸内切酶 ELISA 试剂盒？

•即用型：提供预包被微孔板及所有必需试剂

•超高灵敏度检测：由高特异性单克隆抗体实现，灵敏度高于竞品试剂盒

•省时高效：检测时间缩短约一半，总孵育时间约 2 小时

•宽动态范围：32 pg/ml 至 1000 pg/ml（450 nm 波长处吸光度值）

• 检测限（LOD）：4 pg/ml

•定量限（LOQ）：12 pg/ml

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